背景:环境中残留的游离核酸片段(DNA或RNA)造成的污染, ,实验室中针对核酸和核酸酶污染的传统清除手段存在清除盲区紫外线照射无法触及实验台面接缝处,以及考虑要实验人员的职业保护(如次氯酸钠溶液(有效氯浓度>0.1%)对呼吸道黏膜具有强刺激性,长期接触会增加实验人员的健康的风险), 而核酸清除剂(包括核酸和RNA酶清除剂)的存在是为了解决一个普通清洁和消毒手段无法解决的特定问题, 可实现设备耗材及实验环境的核酸污染深度净化,有效阻断假阳性干扰,其安全无毒的配方设计与便捷操作特性,在提升实验效率的同时,构筑起实验室人员与环境的双重安全屏障。[1]
在核酸酶清除剂有效组分的联合作用下,改变吸附在仪器和实验台表面的核酸的电荷分布,促进核酸脱离被吸附表面,然后再结合擦拭过程中产生的剪切力,进一步使得污染核酸从吸附表面解离出来,进入核酸清除剂体系中,从而达到去除表面核酸污染的效果。在核酸酶清除剂有效组分的联合作用下,仪器、设备和实验台表面核酸酶污染从吸附表面解离出来,进一步被温和失活,被清除。[2]
成分包括:裂解液:(次氯酸钠溶液-碱基是核酸的组成部分之一,而次氯酸离子可以与碱基中的氨基(NH2)和氮(N)原子发生氧化,OCI- + R-NH2 -〉R-NH + C1-+ H20,次氯酸离子可以破坏碱基的结构,使其变性,从而破坏核酸的一二级构象)[3]、碱(氢氧化钠、碳酸氢钠两种碱性物质能破坏DNA的磷酸二酯键和氢键,尤其是RNA的磷酸二酯键,在碱性溶液中十分容易降解,同时碱性环境还有助于保持次氯酸钠的稳定性)[4]、表面活性物质(十二烷基硫酸钠可在碱性体系中起到良好的改善核酸清除剂的渗透和润湿效果的作用)、
过氧化物(过氧化物为过氧化氢和/或过氧化钠-作为核酸清除剂中的失活剂,过氧化氢产生氢氧自由基,破坏其化学键令核酸分子失活,无水乙醇-能使核酸链断裂)
金属离子盐(水溶性铜盐、水溶性锌盐和水溶性亚铁盐中的一种 或几种。,Cu2+、Zn2+和Fe2+可有效催化过氧化氢分解)[5]
污染的来源:
u 气溶胶污染:在高频开展PCR检测的实验室环境中,体系配制环节存在核酸气溶胶污染风险——当开启样本容器、进行液体吸取或移液操作时,实验人员操作产生的扰动可能使核酸分子逸散至空气中,形成具有潜在污染性的气溶胶微粒;而在PCR扩增阶段,由于目标核酸序列呈指数级扩增,当反应管开启瞬间,累积的高浓度扩增产物会以气溶胶形式快速弥散至实验空间,造成实验室环境的核酸污染。
u 器材与试剂:实验器材如移液器、离心管、PCR板等,以及试剂如核酸提取液、扩增酶等,若未实施规范的消毒程序与质量控制措施,可能构成实验室核酸污染的潜在污染源。
应用场景:实验室环境空气、仪器设备(移液器、提取仪、PCR仪、离心机等)、台面设施(试管架、离心管架、电泳槽等)、耗材(离心管、枪头、手套等)及各类材质制品(塑料、乳胶、玻璃、不锈钢等)
使用方法:
通用操作流程
1. 安全准备
取下喷头手柄的卡扣。
2.基础清洁步骤
喷:按压喷壶3-5次,均匀喷洒清除剂至污染表面 等:静置反应3-10分钟(根据污染程度调整) 擦:用干净干/湿抹布或纸巾彻底擦拭表面。
分场景操作指南
(1)台面及设备表面
操作:直接喷洒→喷雾自然降落后,立即用干纸巾擦拭→可立即实验。
用量:约3ml/㎡。
重度污染:重复2-3次,间隔≥4小时。
(2)立体空间(气溶胶/空气消毒)
操作:喷口斜向上15-60°喷洒→待喷雾降落→物体表面用干纸巾擦拭,地面用拖把清洁。
用量:约10ml/m³。
重度污染:处理2-3次,间隔≥4小时,并检测效果。
(3)精密仪器
PCR仪
外表:同台面清洁(喷→立即干擦)。
金属内孔:清除剂浸湿棉棒→擦拭每个加热孔→干棉棒擦净残留→可立即运行。
核酸提取仪:喷洒表面→反应5-10分钟→蒸馏水彻底擦拭。
移液枪
① 拆卸后,污染部件浸泡清除剂5-10分钟;
② 蒸馏水彻底冲洗→晾干→组装。
(4)实验容器及工作区
玻璃/塑料器皿:浸泡清除剂5-10分钟→蒸馏水彻底冲洗→晾干备用。
超净台/生物安全柜:喷洒表面→反应5-10分钟→蒸馏水彻底擦拭。
(5)气溶胶污染
轻度污染:全面喷洒清除剂→等待1-2小时→配合1:50稀释84消毒液擦拭台面/地面。
重度污染:重复处理2-3次,检测结果。[6]
1. 仅限科学实验研究使用,严禁用于临床诊断、治疗等领域。
2. 使用时需佩戴口罩,避免直接接触皮肤、粘膜及眼睛;若不慎接触,请立即用清水冲洗。
3. 喷洒前请确保超净工作台或生物安全柜已关闭,并检查环境温度,低温下若出现沉淀属正常现象,不影响使用。
4. 清洁移液器或耗材后,需用无污染的水再次清理以去除残留。
5. 使用时请拔掉喷头处的防漏液装置,并注意不要对着皮肤、眼睛等部位喷洒。
6. 若离心管或试管内部接触到本产品,请确保彻底干燥后再加入核酸模板,以免影响实验结果。[7]
产品介绍:
公司介绍
参考文献:
[1]. 新品推荐卡尤迪核酸清除剂,5分钟轻松解决核酸污染困扰.
[2]. 发明专利申请说明书CN202211536311.0.
[3]. 次氯酸钠去除核酸的原理.#小程序://百度文库/gNsVkJjsieaPXyz
[4]. 发明专利申请说明书CN 119685110 A.
[5]. 发明专利申请书 CN 115820343 A.
[6]. 核酸酶清除剂(RNase and DNase Cleaner)-高效、便捷的核酸酶污染治理方案.
[7]. 核酸清除剂.https://mp.weixin.qq.com/s/6Wh0NMegz2sb7wwAmyh0GQ
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