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做实验总纠结TAE和TBE怎么选?看完差异就懂了

发布时间:2025-02-17      点击次数:71

一、基本概念介绍

    TAE(Tris-Acetate-EDTA Buffer)和TBE(Tris-Borate-EDTA Buffer)是分子生物学实验中常用的两种电泳缓冲液。TAE缓冲液由Tris(三羟甲基氨基甲烷)、乙酸(acetic acid)和EDTA(乙二胺四乙酸)按特定比例混合而成,主要用于DNA和RNA的凝胶电泳。而TBE缓冲液则是由Tris、硼酸(boric acid)和EDTA组成,同样是核酸电泳过程中不可或缺的缓冲盐溶液。

    共同点:

    Tris 是这两种缓冲液的基础成分之一,为缓冲体系提供稳定的 pH 环境。

    Mg2+是DNA酶的激活剂,EDTA是一种螯合剂,能与Mg2+等二价金属离子结合,可防止电泳时被DNA酶降解。

    两者的成分共同作用,维持电泳过程中溶液的 pH 稳定在8.0,保证实验结果的准确性和可靠性。

二、TAE和TBE的不同点

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    下面从电泳效果、适用范围、缓冲能力、成分、价格、毒性、储存条件进行分析。

1、电泳效果

    TAE:双链线状DNA在TAE中的迁移率比在TBE中快约10%,超螺旋DNA在TAE中电泳时更符合实际相对分子质量,TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量。TAE对大片段DNA(大于13kb)的分离效果较好

    TBE:对于小于1kb的DNA片段分离效果更好,分辨率较高,但用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,使DNA片段的回收率降低。

2、适用范围

    TAE:适用于需要回收DNA片段的实验,如DNA的琼脂糖凝胶电泳回收等。常用于研究盐对DNA电泳速度的影响。

    TBE:常用于DNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其适合对小分子DNA以及RNA的电泳。TBE中的EDTA可螯合二价阳离子,抑制DNA酶活性,防止PCR扩增产物降解,但由于硼酸成分的存在,会影响DNA回收效率以及后续的酶反应,不宜在回收电泳中使用

3、缓冲能力

    TAE:缓冲容量相对较小,长时间电泳时,如过夜电泳,可能会出现缓冲液被消耗,导致凝胶阳极一侧酸性化,影响电泳结果。

    TBE:缓冲能力较强,能在较长时间的电泳过程中维持稳定的pH环境,更适合长时间电泳

4、成分

50×TAE Buffer(pH8.5) 

  ■ 浓度   2 mol/L Tirs-醋酸,100 mM EDTA

  ■ 配置体积      1 L

  ■ 操作方法 

    1. 称量试剂,于 1 L 烧杯中。


Tris

242 g

Na2EDTA·2H2O

37.2 g

   

   2.  往烧杯加入约 800 ml 去离子水,搅拌至完全溶解。

   3.加 57.1 ml 醋酸,充分搅拌。

   4.加去离子水定容至 1 L ,室温保存。


10×TBE Buffer(pH8.3) 

  ■ 浓度    890 mM Tirs-硼酸,20 mM EDTA

  ■ 配置体积       1 L

  ■ 操作方法 

    1.称量试剂,于 1 L 烧杯中。

Tris

108 g

Na2EDTA·2H2O

7.44 g

硼酸

55 g

   

   2.往烧杯加入约 800 ml 去离子水,搅拌至完全溶解。

   3. 加去离子水定容至 1 L ,室温保存。

5、价格

    TAE:价格相对较便宜

    TBE:通常比TAE花费稍

6、毒性:虽然TAE和TBE在正常使用下都是安全的,但TBE中的硼酸被认为具有潜在的毒性,因此在处理和使用时需更加小心。

7、储存条件

    TAE:溶解度大,易于储存,一般不存在沉淀问题。

    TBE:溶解度小,不易长期储存,容易产生沉淀,在配制和使用时需注意观察溶液状态。

三、产品介绍&关于我们


产品                                                 货号                               规格

TAE(50X )核酸电泳缓冲液          FTAE606-01                    500ml

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产品                                                 货号                               规格

TBE(10X )核酸电泳缓冲液          FTAE606-02                    500ml

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