一、基本概念介绍
TAE(Tris-Acetate-EDTA Buffer)和TBE(Tris-Borate-EDTA Buffer)是分子生物学实验中常用的两种电泳缓冲液。TAE缓冲液由Tris(三羟甲基氨基甲烷)、乙酸(acetic acid)和EDTA(乙二胺四乙酸)按特定比例混合而成,主要用于DNA和RNA的凝胶电泳。而TBE缓冲液则是由Tris、硼酸(boric acid)和EDTA组成,同样是核酸电泳过程中不可或缺的缓冲盐溶液。
共同点:
Tris 是这两种缓冲液的基础成分之一,为缓冲体系提供稳定的 pH 环境。
Mg2+是DNA酶的激活剂,EDTA是一种螯合剂,能与Mg2+等二价金属离子结合,可防止电泳时被DNA酶降解。
两者的成分共同作用,维持电泳过程中溶液的 pH 稳定在8.0,保证实验结果的准确性和可靠性。
二、TAE和TBE的不同点
下面从电泳效果、适用范围、缓冲能力、成分、价格、毒性、储存条件进行分析。
1、电泳效果
TAE:双链线状DNA在TAE中的迁移率比在TBE中快约10%,超螺旋DNA在TAE中电泳时更符合实际相对分子质量,TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量。TAE对大片段DNA(大于13kb)的分离效果较好。
TBE:对于小于1kb的DNA片段分离效果更好,分辨率较高,但用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,使DNA片段的回收率降低。
2、适用范围
TAE:适用于需要回收DNA片段的实验,如DNA的琼脂糖凝胶电泳回收等。常用于研究盐对DNA电泳速度的影响。
TBE:常用于DNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其适合对小分子DNA以及RNA的电泳。TBE中的EDTA可螯合二价阳离子,抑制DNA酶活性,防止PCR扩增产物降解,但由于硼酸成分的存在,会影响DNA回收效率以及后续的酶反应,不宜在回收电泳中使用。
3、缓冲能力
TAE:缓冲容量相对较小,长时间电泳时,如过夜电泳,可能会出现缓冲液被消耗,导致凝胶阳极一侧酸性化,影响电泳结果。
TBE:缓冲能力较强,能在较长时间的电泳过程中维持稳定的pH环境,更适合长时间电泳。
4、成分
50×TAE Buffer(pH8.5)
■ 浓度 2 mol/L Tirs-醋酸,100 mM EDTA
■ 配置体积 1 L
■ 操作方法
1. 称量试剂,于 1 L 烧杯中。
Tris | 242 g |
Na2EDTA·2H2O | 37.2 g |
2. 往烧杯加入约 800 ml 去离子水,搅拌至完全溶解。
3.加 57.1 ml 醋酸,充分搅拌。
4.加去离子水定容至 1 L ,室温保存。
10×TBE Buffer(pH8.3)
■ 浓度 890 mM Tirs-硼酸,20 mM EDTA
■ 配置体积 1 L
■ 操作方法
1.称量试剂,于 1 L 烧杯中。
Tris | 108 g |
Na2EDTA·2H2O | 7.44 g |
硼酸 | 55 g |
2.往烧杯加入约 800 ml 去离子水,搅拌至完全溶解。
3. 加去离子水定容至 1 L ,室温保存。
5、价格
TAE:价格相对较便宜。
TBE:通常比TAE花费稍贵。
6、毒性:虽然TAE和TBE在正常使用下都是安全的,但TBE中的硼酸被认为具有潜在的毒性,因此在处理和使用时需更加小心。
7、储存条件
TAE:溶解度大,易于储存,一般不存在沉淀问题。
TBE:溶解度小,不易长期储存,容易产生沉淀,在配制和使用时需注意观察溶液状态。
三、产品介绍&关于我们
产品 货号 规格
TAE(50X )核酸电泳缓冲液 FTAE606-01 500ml
产品 货号 规格
TBE(10X )核酸电泳缓冲液 FTAE606-02 500ml
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